Pesquisa de mutação no gene, CEBPA, leucemia mielóide aguda, Vários Materiais

Orientações do cliente

I - Informação sobre o exame

• É necessário apresentar solicitação médica.
• Cliente com idade inferior a 16 anos, necessário estar acompanhado de um responsável adulto no dia do exame.

II - Material

• A análise pode ser realizada em amostras de sangue periférico ou de medula óssea, a critério médico, colhidas ou não no Fleury.
• Caso a coleta de medula óssea seja realizada no Fleury, o cliente deve agendar o procedimento previamente.

III - Material enviado

• A amostra deve ser mantida sob refrigeração (2-8ºC) e entregue até 72 horas após a coleta.
• O Fleury não aceita materiais enviados em seringa com agulha.

Orientações necessárias

I - Informação sobre o exame

• É necessário apresentar solicitação médica.
• Cliente com idade inferior a 16 anos, necessário estar acompanhado de um responsável adulto no dia do exame.

II - Material

• A análise pode ser realizada em amostras de sangue periférico ou de medula óssea, a critério médico, colhidas ou não no Fleury.
• Caso a coleta de medula óssea seja realizada no Fleury, o cliente deve agendar o procedimento previamente.

III - Material enviado

• A amostra deve ser mantida sob refrigeração (2-8ºC) e entregue até 72 horas após a coleta.
• O Fleury não aceita materiais enviados em seringa com agulha.

Processamento e adequação da amostra

• Receber a amostra em embalagem REF e mantê-la nesta condição até a manipulação.
• Não manusear.
• Enviar o material o mais rápido possível para a seção, refrigerado.
• Rejeitar amostras colhidas em heparina.
• Não aceitar material enviado em seringa com agulha.

Montagem de embalagem REF :

• Utilizar uma caixa de isopor de 3 litros
• Forrar a base e as laterais menores com gelox
• A grade branca de coleta deve ficar entre os gelox das laterais e em contato com o gelox da base
• O gelox desta caixa caixa devem ser substituídos a cada 5 horas.

Estabilidade da amostra:

• Temperatura ambiente: não aceitável;
• Refrigerada (2-8ºC): 72 horas;
• Congelada (-20ºC): não aceitável

Método

• Sequenciamento da região codificadora do gene CEBP-alfa por meio da metodologia Sanger.

Caso sejam identificadas duas ou mais variantes patogênicas será conduzida análise para a definição do status CIS/TRANS das mutações, ou seja, investigação sobre a presença das mutações em um único alelo ou em alelos distintos.

Valor de referência

Mutação não detectada.

Interpretação e comentários

• Este exame é útil na investigação de pacientes que apresentam leucemia mieloide aguda e deve, preferencialmente, ser realizado por ocasião do diagnóstico. No grupo de indivíduos com cariótipo normal, a realização do sequenciamento do gene CEBP-alfa, juntamente com a pesquisa de mutação no gene NPM1 e a pesquisa da duplicação interna em tandem de FLT3, contribui para o planejamento terapêutico e a definição prognóstica.
• O sequenciamento do gene CEBP-alfa abrange toda a sua porção codificante, assim como sua região flanqueadora. As mutações identificadas são confrontadas com o banco de dados do Catalogue of Somatic Mutations in Cancer (Cosmic), com o relato daquelas consideradas clinicamente significativas.
• O presente teste permite identificar mutações que estejam presentes em, pelo menos, 25% dos alelos da amostra. Quando duas mutações são encontradas procede-se com a definição do status CIS/TRANS, ou seja, investigação sobre a presença das mutações em um único alelo ou em alelos distintos.
• A presença de duas mutações no gene CEBP-alfa, quando localizadas em alelos distintos (status TRANS), associa-se a um melhor prognóstico. A identificação de uma única mutação nesse gene não tem implicação prognóstica.