PML-RARA, Hibridação in situ, sangue periférico

Orientações do cliente

• Este exame é realizado em material de medula óssea.
• A coleta do material pode ser realizada no laboratório, mediante agendamento prévio.
• Amostras colhidas fora do laboratório devem ser mantidas sob refrigeração e entregues até 24 horas após a coleta.

Orientações necessárias

• Não realizamos análise de material de anatomopatológico desse exame já colhido pelo médico em bloco de parafina, somente se for de citologia.
• Este exame é realizado em sangue periférico e pode ser coletado de segunda a domingo, inclusive feriados, durante o horário de atendimento normal do Fleury.
• Material Enviado - Somente serão recebidas amostras que estiverem nessas condições: entregar a unidade em até 12 horas após a coleta, em meio de transporte e sob refrigeração, pois há risco de perda da viabilidade celular.
• Não serão aceitas amostras enviadas em seringas.

Para saber sobre estes exames e como realizar, acesse:

https://www.fleurygenomica.com.br/

Processamento e adequação da amostra

• Encaminhar o material refrigerado ao setor o mais rápido possível, num período máximo de 24 horas, juntamente com o questionário previamente preenchido pelo cliente e a receita médica.

Não serão aceitas amostras enviadas em seringas.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2-8 ºC): 24 horas;

Congelada (-20 ºC): não aceitável.

Método

• Hibridação "in situ" por fluorescência. Trata-se de uma reação onde se usa sonda (DNA) marcada com fluorocromo que vai se ligar ao DNA alvo complementar.
• São contadas, no mínimo, 200 intérfases por pelo menos dois observadores.

Valor de referência

Sonda PML/RARA DF

Controle normal < 4% de células com duas fusões de PML::RARA e um sinal extra separado de PML e RARA

Interpretação e comentários

A hibridação in situ por fluorescência (FISH) é particularmente útil na investigação de leucemias promielocíticas agudas (LPA ou LMA-M3) porque detecta a fusão do gene PML com o gene do receptor do ácido retinóico (RARA), a qual forma o gene quimérico PML::RARA. Esse rearranjo gênico ocorre em aproximadamente 90% dos casos e é o equivalente molecular da translocação entre os cromossomos 15 e 17. O exame é rápido, sensível e específico, podendo ser feito tanto em metáfase quanto em intérfase.